Abrir una caja de un Kit ELISA por primera vez puede ser abrumador. Encontrarás múltiples botellas con tapones de colores, polvos liofilizados, una placa envuelta en aluminio y un manual técnico denso.
Sin embargo, conocer la función exacta de cada componente es la diferencia entre un experimento exitoso y uno fallido. En Kit-Elisa.es, sabemos que la calidad de los reactivos es tan importante como la técnica.
Hoy hacemos un «unboxing» técnico para explicarte las partes esenciales de nuestros kits y por qué es crucial no mezclar lotes diferentes.
1. La Microplaca (Microplate) de 96 pocillos
Es el corazón del ensayo. En los kits comerciales modernos (2026), la placa ya viene pre-tapizada (pre-coated) con el anticuerpo de captura.
- La ventaja: Ahorras 24 horas de trabajo manual. No tienes que incubar el anticuerpo tú mismo.
- Formato «Stripwell»: Nuestras placas son desmontables en tiras de 8 pocillos. Si solo tienes 16 muestras, usas 2 tiras y guardas el resto en su bolsa sellada para el futuro. ¡No desperdicies placa!
2. Los Estándares (Standards)
Son los botes más importantes de la caja. Suelen venir en formato liofilizado (polvo) para mayor estabilidad.
- Función: Contienen una cantidad conocida de la proteína pura (ej. 10 ng de IL-6).
- Uso: Con ellos construirás la Curva Estándar. Al diluirlos en serie, le dices al lector: «Esta intensidad de color equivale a esta concentración».
- ⚠️ Error común: Una vez reconstituidos, los estándares son inestables. Úsalos inmediatamente o haz alícuotas y congélalos a -20ºC (si el manual lo permite).
3. Buffer de Lavado (Wash Buffer)
Suele venir como un concentrado (ej. 20X o 25X) que cristaliza en la nevera.
- Función: Eliminar todo lo que no se ha unido específicamente a la placa.
- Truco de experto: Si ves cristales en la botella, caliéntala suavemente a 37ºC hasta que se disuelvan antes de diluirla. Lavar con cristales rayará el fondo de los pocillos y te dará picos falsos en la lectura.
4. Reactivo de Detección (Conjugado)
Dependiendo del tipo de ELISA que estés haciendo, este bote contendrá:
- Un anticuerpo biotinilado.
- O una enzima conjugada (como HRP – Peroxidasa de Rábano). Es el reactivo encargado de reconocer al analito y prepararlo para la reacción de color. Es muy sensible a la luz, ¡protégelo!
5. Sustrato TMB (Solución de Substrato)
Es un líquido transparente (o ligeramente azulado si está oxidado, ¡ojo!).
- Función: La enzima HRP rompe este sustrato y lo vuelve azul.
- Señal de alarma: Si sacas el TMB de la botella y ya es azul, el reactivo está contaminado. Debe ser incoloro hasta que toque la enzima.
6. Solución de Parada (Stop Solution)
Suele ser un ácido (ácido sulfúrico o clorhídrico). ¡Manejar con guantes!
- Función: Detiene la reacción enzimática bruscamente.
- El cambio mágico: Al añadirla, el color azul vira a amarillo. Es en ese momento cuando la placa está lista para leerse a 450 nm.
¿Puedo mezclar componentes de cajas diferentes?
La respuesta corta es: NO. Aunque te sobre «Wash Buffer» de un kit antiguo, nunca lo uses con uno nuevo, ni siquiera si es la misma referencia. Los fabricantes calibran los reactivos (especialmente estándares y conjugados) por lotes (Lot-Specific). Mezclarlos es la receta perfecta para obtener datos erróneos.
¿Buscas kits completos y validados?
En Kit-Elisa.es suministramos kits que incluyen todos estos componentes optimizados para trabajar en armonía. Olvídate de comprar anticuerpos y buffers por separado.